通常，分光光度計確定波長都采用如下兩種方法：　　

 

1、零級光查找法

 

   該法是利用光譜帶上零級光處波長等于零，而能量大這一特點實現的。該方法的特點是簡單，可適用于可見分光光度計，也可適用于紫外可見分光光度計，缺點是由此法確定的波長精度不高，重復性也不好，譜元低檔儀器用此法，如1102，1500,1502等；　　

 

2、氘燈能量譜線查找法

 

   該法是利用氘燈點亮后其固有的能量譜線（656.1nm）來確定波長的。從氘燈能量分布圖中看出，在可見光的656.1nm處,氘燈有一個脈沖式的能量峰出現，光度計在開機以后，先找到該處的能量大值，確定此點為656.1nm。該方法的特點是簡單，所確定波長準確，重復性也很好。但只能用于紫外可見分光光度計，而不能用于可分光光度計。

 

二、微量分光光度計的自檢過程　　　　

 

    微量分光光度計在自檢過程中通常要完成以下自檢項目：A燈源檢查；B濾色片檢查；C自動樣品架檢查（若有安裝的話）；D數據通訊口檢查；E定波長；F能量檢查等。