NanoDrop One 超微量分光光度計是實驗室快速檢測核酸、蛋白等樣品濃度與純度的核心設備,其檢測精度高、樣品用量少,做好樣品檢測的細節把控,能有效避免數據偏差、保障檢測結果可靠,以下是關鍵注意事項:
樣品預處理與用量把控
檢測前需確保樣品無雜質、無氣泡,若樣品中存在顆粒物、纖維等雜質,需先通過離心(12000rpm,5-10min)或 0.22μm 濾膜過濾處理,防止雜質附著檢測探頭影響吸光度讀數;同時要避免樣品中混入氣泡,否則會造成數據波動或無效讀數。該設備僅需 0.5-2μL 樣品即可檢測,取樣時需用移液槍精準控制體積,不可過量(過量易溢出污染探頭),也不可不足(不足無法形成完整液柱,導致檢測失敗);且移液槍槍頭需無殘留、無污染,建議一次性使用,防止交叉污染。
檢測探頭清潔與維護
檢測探頭的潔凈度直接決定數據準確性,每次檢測前后需用去離子水或適配的溶劑(如檢測蛋白用緩沖液、檢測有機溶劑樣品用無水乙醇)擦拭探頭表面,去除殘留樣品;若樣品黏性較大(如含高濃度甘油的樣品),需用無塵棉簽蘸取對應溶劑輕輕擦拭,再用去離子水清潔,最后用無塵紙吸干水分,嚴禁刮擦探頭光學表面。若探頭出現頑固污漬,可使用設備專用清潔液處理,不可用強酸強堿或粗糙工具清潔,避免損傷光學元件。
檢測環境與參數設置
設備需放置在穩定、無強光直射的環境中,檢測時環境溫度需控制在 15-30℃,避免溫度劇烈波動影響檢測精度;同時要保持設備水平放置,防止樣品液柱因設備傾斜出現形態異常。檢測前需根據樣品類型正確設置參數,比如檢測 dsDNA 選擇 A260/A280 模式、檢測蛋白選擇 A280 模式,還要確認基線校準完成,若基線波動超出允許范圍,需重新校準后再進行檢測;對于特殊樣品(如低濃度核酸、帶熒光標記的樣品),需選擇對應檢測程序,不可用通用模式強行檢測。
樣品回收與后續清理
若樣品需回收,需在檢測完成后立即用潔凈移液槍將樣品從探頭處吸回至原管,操作時要避免接觸探頭造成二次污染,且回收的樣品需做好標識,不可與未檢測樣品混淆。無需回收的樣品,需用去離子水徹底清潔探頭和周邊臺面,防止樣品殘留滋生細菌或腐蝕設備;檢測結束后,需關閉設備檢測艙蓋,定期清理設備外殼灰塵,同時做好檢測數據的備份與記錄,便于后續實驗追溯。