三維細胞培養系統如今很好的應用在科研實驗中，今天就來介紹細胞培養的一些常見問題解答：
　　1.冷凍管應如何解凍？
　　取出冷凍管后須立即放入37℃水浴箱中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。
　　2.可否使用與原先培養條件不同之培養基？
　　不能；每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。
　　3.懸浮性細胞應如何繼代處理？
　　一般僅需持續加入新鮮培養基于原三維細胞培養系統角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養液太多時，可將培養角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養液至另一新的培養角瓶，加入新鮮培養基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。
　　6.欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？
　　欲回收動物細胞，其離心速率一般為1,000rpm)，5-10分鐘，過高之轉速，將造成細胞死亡。
　　7.細胞之接種密度為何？
　　依照細胞株基本數據上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因。
　　8.冷凍保存細胞之方法？
　　方法一：冷凍管置于4℃30~60分鐘→(-20°C30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
　　方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80℃以下，再放入液氮槽長期儲存。
　　-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
　　9.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？
　　研究人員在細胞培養時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：
　　培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于80℃太久。