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熒光定量PCR儀于臨床疾病診斷的研究

更新時間:2017-08-08瀏覽:2443次
  熒光定量PCR儀可標記有熒光素的探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律,與模板DNA互補配對的探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得CT值,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。
  熒光定量PCR儀在臨床疾病診斷上有著重要的意義,一起來看看:
  1.熒光定量PCR儀在結核菌檢測中的應用及意義
  結核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在:區(qū)分TB與其它分枝桿菌;檢測TB耐藥基因;提高TB的陽性檢出率。
  2.熒光定量PCR儀在HBV檢測中的應用及意義
  了解乙肝病毒在體內存在的數(shù)量;是否復制;是否傳染,傳染性有多強;是否有必要服藥;肝功能異常改變是否由病毒引起;判斷病人是適合用哪類抗病毒藥物;判斷藥物治療的療效。
  3.熒光定量PCR儀在CT檢測中的應用
  CT是非淋菌性尿道炎的主要病原微生物之一,有時還可引起不育等其它疾病。CT為專性細胞寄生性,一般培養(yǎng)不能生長,只有在活細胞內才能增殖復制,實驗室通過細胞培養(yǎng)觀察包涵體。但因操作復雜,技術要求高,需時間長,并不適于臨床檢測。免疫學方法有直接免疫熒光法、EIA法等,但這兩種方法無論是檢測抗原還是抗體陽性率均不足50%,用單抗會丟失位點、多抗有交叉反應,在高危人群篩查中常與金黃色葡萄球菌、鏈球菌、淋球菌等發(fā)生交叉反應使其特異性受到影響,因此,國內外專家一致認為CT的基因診斷方法應定為“金標準”。
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